O exame compreende dosagens seriadas de hormônio de crescimento e glicose (basal e após estímulo com insulina). Após jejum de oito horas, punção venosa com cateter e repouso de 20 minutos. Coletar a amostra basal. Administrar insulina regular via endovenosa 0,10 UI/Kg de peso corporal. Coletar amostras de soro e plasma fluoretado nos tempos 15, 30, 45, 60, 90 e 120 minutos ou conforme orientação médica. Dosar GH e glicose em todas as amostras. Obs: Manter soro glicosado a 50% para infusão venosa lenta, caso a dosagem de glicose for inferior a 25 mg/dL. A duração padrão do teste é de 2 horas ou conforme solicitação médica. É necessário informar os nomes dos medicamentos utilizados nos últimos 30 dias. Contra-indicação: esta prova não deve ser realizada em indivíduos com antecedentes de convulsão ou doença coronariana. O exame tem, como vantagem, o fato de permitir a avaliação concomitante do eixo adrenocorticotrófico por meio das dosagens de cortisol nas amostras, sendo útil na avaliação de deficiência combinada de hormônios hipofisários. Por outro lado, sua desvantagem principal é a natureza desagradável dos sintomas da hipoglicemia.